目的探讨急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿血清微小RNA-494-3p(miR-494-3p)和微小RNA-652-5p(miR-652-5p)水平及其临床意义。方法选择2020年1月至2023年12月该院收治的96例ALL患儿作为ALL组，另选择96例同期在该院进行健康体检的健康儿童作为健康组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-494-3p、miR-652-5p水平。采用多因素Logistic回归分析影响ALL发生的因素；绘制受试者工作特征（ROC）曲线评估血清miR-494-3p、miR-652-5p对ALL的诊断价值。结果ALL组血清miR-494-3p水平低于健康组，血清miR-652-5p水平高于健康组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。不同白细胞计数水平、染色体核型、混合谱系白血病基因重排的ALL患儿血清miR-494-3p和miR-652-5p水平比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，miR-652-5p水平升高是ALL发生的危险因素（P＜0.05），miR-494-3p水平升高是ALL发生的保护因素（P＜0.05）。ROC曲线分析结果显示，血清miR-494-3p、miR-652-5p单独及联合诊断ALL的曲线下面积（AUC）分别为0.793、0.760、0.903，2项联合诊断ALL的AUC显著大于各指标单独诊断的AUC（P＜0.05）。结论ALL患儿血清miR-494-3p水平下调、miR-652-5p水平上调，2项指标与ALL患儿的临床病理特征有关，有潜力作为诊断ALL的生物标志物。