国家自然科学基金面上项目(82573226、82173256);国家科技重大专项(2023ZD0501506);陕西省重点研发计划(2024SF-GJHX-04);消化系肿瘤整合防治全国重点实验室课题(CBSKL2022ZZ55)
目的探讨血小板反应蛋白1(THBS1)在调控结直肠癌(CRC)进展中的作用。方法使用GEPIA2、TGGA、GTEx数据库分析THBS1在CRC中的表达与免疫浸润的关系。根据不同转染方式,将HCT8细胞分为转染阴性对照小干扰RNA(siRNA)的阴性对照组(siNC组)、转染THBS1 siRNA-1的敲低组1(siTHBS1-1组)和转染THBS1 siRNA-2的敲低组2(siTHBS1-2组)。 采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测THBS1表达情况。使用Transwell实验和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷实验验证THBS1对HCT8细胞迁移、侵袭和增殖能力的影响。使用多重免疫荧光染色验证THBS1在CRC患者的肿瘤组织和癌旁组织中的表达。结果GEPIA2数据库分析结果显示,CRC组织THBS1信使RNA(mRNA)的中位表达水平低于正常组织。TIMER2.0在线平台分析结果显示,结肠腺癌、食管癌、膀胱尿路上皮癌患者癌组织THBS1基因表达水平低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05),直肠腺癌患者癌组织THBS1基因表达水平有低于癌旁组织的趋势。同时使用GEPIA2网站联合GTEx数据库分析结果显示,肾上腺皮质癌、卵巢癌、结肠腺癌和直肠腺癌患者癌组织THBS1 mRNA表达水平低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。TIMER2.0在线平台分析结果显示,结肠腺癌患者THBS1 mRNA表达水平与CD8 +T细胞、巨噬细胞/单核细胞、中性粒细胞、髓样树突状细胞的浸润水平呈正相关(P<0.05)。siTHBS1-1组和siTHBS1-2组迁移和侵袭的细胞数量多于siNC组,细胞增殖率高于siNC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CRC癌组织中组织学评分低于癌旁组织,差异有统计学意义(P=0.023)。结论THBS1在CRC中低表达,敲低THBS1可以促进CRC细胞的迁移、侵袭和增殖。
苗格 ,黄小玉 ,张渊慈 ,王好甲 ,王君澍 ,王新 ,卢瑗瑗 ,赵晓迪 △. THBS1调控结直肠癌进展的生物信息学分析及验证[J].检验医学与临床,2025,22(21):2881-2887