目的基于仁纺锤体相关蛋白1（NUSAP1）、解聚素-金属蛋白酶17（ADAM17）及内质网蛋白5（ERp5）表达探讨补阳还五汤对乏氧微环境下肺癌A549细胞的作用机制。方法构建NUSAP1过表达、ADAM17过表达、ERp5过表达A549细胞系并使用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）进行验证，将A549细胞分为对照组、乏氧组、补阳组、补阳+pc-NUSAP1组、补阳+pc-ADAM17组、补阳+pc-ERp5组，除对照组外其余各组细胞均在乏氧条件下培养，除对照组、乏氧组外其余各组均给予补阳还五汤干预（1 mg/mL），补阳+pc-NUSAP1组转染pcDNA-NUSAP1质粒，补阳+pc-ADAM17组转染pcDNA-ADAM17质粒，补阳+pc-ERp5组转染pcDNA-ERp5质粒。采用RT-qPCR检测各组细胞NUSAP1、ADAM17、ERp5 mRNA相对表达量；比较各组细胞增殖、侵袭、迁移和自然杀伤（NK）细胞免疫杀伤情况；采用Western blotting检测各组细胞周期蛋白A2（CCNA2）、细胞周期蛋白D1（CCND1）、Vimentin、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、MHCⅠ类链相关分子A（MICA）、MHCⅠ类链相关分子B（MICB）蛋白相对表达量。 结果乏氧组细胞的NUSAP1、ADAM17、ERp5 mRNA相对表达量及CCNA2、CCND1、Vimentin、MMP-9、MICA、MICB蛋白相对表达量均高于对照组（P<0.05），细胞增殖率、细胞侵袭数、划痕愈合率高于对照组（P<0.05），NK细胞杀伤活性低于对照组（P<0.05）。补阳组NUSAP1、ADAM17、ERp5 mRNA相对表达量及CCND1、CCNA2、Vimentin、MMP-9、MICA、MICB蛋白相对表达量均低于乏氧组（P<0.05），细胞增殖率、细胞侵袭数、划痕愈合率均低于乏氧组（P<0.05），NK细胞杀伤活性高于乏氧组（P<0.05）。补阳+pc-NUSAP1组的NUSAP1 mRNA相对表达量、细胞增殖率、细胞侵袭数、划痕愈合率及CCND1、CCNA2、Vimentin、MMP-9蛋白相对表达量均高于补阳组（P<0.05）。补阳+pc-ADAM17组的ADAM17 mRNA相对表达量、细胞侵袭数、划痕愈合率和Vimentin、MMP-9、MICA、MICB蛋白相对表达量均高于补阳组（P<0.05），NK细胞杀伤活性低于补阳组（P<0.05）。补阳+pc-ERp5组ERp5 mRNA相对表达量和MICA、MICB蛋白相对表达量均高于补阳组（P<0.05），NK细胞杀伤活性低于补阳组（P<0.05）。结论补阳还五汤可抑制乏氧微环境下A549细胞增殖、转移和增加NK细胞对肿瘤的杀伤能力，可能与抑制NUSAP1、ADAM17及ERp5表达有关。