目的探讨半乳甘露聚糖(GM)试验、微生物培养、宏基因第二代测序技术(mNGS)诊断慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并真菌感染价值比较及临床治疗指导意义。方法选取2019年8月至2024年8月该院收治的105例经临床诊断为COPD合并真菌感染患者和105例疑似感染但最终证实为单纯COPD患者作为研究对象。比较GM试验、微生物培养、mNGS诊断结果、诊断效能及时效性，分析mNGS与微生物培养检出真菌的分布情况，并分析抗菌药物对不同检测方法检出率的影响及mNGS对临床治疗的指导作用。结果105例经临床诊断为COPD合并真菌感染患者，GM试验检出真阳性55例，微生物培养检出真阳性51例，mNGS检出真阳性80例。mNGS的诊断灵敏度、准确度、阴性预测值均高于GM试验、微生物培养，差异有统计学意义(P＜0.05)。GM试验的诊断灵敏度、准确度、阴性预测值与微生物培养比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。3种方法的诊断特异度、阳性预测值比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。GM试验耗时(26.00±1.64)h，微生物培养耗时(97.25±1.30)h，mNGS耗时(22.79±0.99)h，mNGS耗时短于GM试验、微生物培养，且GM试验耗时短于微生物培养，差异均有统计学意义(P＜0.05)。mNGS检出真菌82株，微生物培养检出真菌51株。51例mNGS与微生物培养结果一致；29例mNGS与微生物培养结果不一致。应用抗菌药物时，mNGS检出率高于GM试验、微生物培养，差异有统计学意义(P＜0.05)，未应用抗菌药物时3种方法的检出率比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。8例患者根据mNGS检测结果调整用药，其中7例经治疗后短期内即明显好转，1例患者合并多重感染，疗程延长，治疗后均达出院标准，无病死发生。结论与GM试验、微生物培养相比，mNGS在COPD合并真菌感染诊断中具有一定优势，灵敏度、准确度、阴性预测值均更高，可作为临床诊断真菌感染的辅助手段，并可指导临床合理用药。