目的探讨急性缺血性脑卒中（AIS）患者血清微小RNA(miR）-214-3p、miR-182-5p、miR-181b表达水平与病情程度和预后的关系。方法选取2021年9月至2024年9月邯郸市第一医院收治的178例AIS患者作为观察组，根据美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分，分为轻型组（NIHSS评分＜5分）73例、中型组（NIHSS评分5~15分）47例和重型组（NIHSS评分＞15分）58例。根据治疗后3个月的改良Rankin量表评分，将患者分为预后良好组（0~2分）和预后不良组（3~6分）。选取同期该院100例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测AIS患者和健康者血清miR-214-3p、miR-182-5p、miR-181b的表达水平。采用多因素Logistic回归分析AIS患者预后不良的影响因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-214-3p、miR-182-5p和miR-181b对AIS患者预后不良的预测价值。结果AIS患者血清miR-214-3p表达水平高于健康者（P<0.05），而血清miR-182-5p、miR-181b表达水平低于健康者（P<0.05）；重型组血清miR-214-3p表达水平高于中型组、轻型组（P<0.05），而血清miR-182-5p、miR-181b表达水平低于中型组、轻型组（P<0.05）；中型组血清miR-214-3p表达水平高于轻型组（P<0.05），而血清miR-182-5p、miR-181b表达水平低于轻型组（P<0.05）。与预后良好组比较，预后不良组血清miR-214-3p表达水平升高，血清miR-182-5p、miR-181b表达水平降低（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，血清miR-214-3p水平升高为AIS患者预后不良的危险因素（P<0.05），血清miR-182-5p、miR-181b水平升高为保护因素（P<0.05）。AIS患者预后不良血清miR-214-3p、miR-182-5p、miR-181b联合预测的曲线下面积（AUC）为0.892，高于3项指标单独预测的AUC（Z联合-miR-214-3p=2.192、P=0.028，Z联合-miR-182-5p=2.145、P=0.032，Z联合-miR-181b=2.242、P=0.025）。结论AIS患者血清miR-214-3p表达水平升高，血清miR-182-5p和miR-181b表达水平降低，且3项指标与AIS患者病情程度和不良预后紧密相关，可以作为预后不良的预测指标，3项指标联合检测对评估AIS患者预后有重要意义。