目的探讨超声参数联合血清miR-129-5p、miR-654-5p对乳腺癌的诊断价值。方法选取2021年12月至2023年12月在湖北省十堰市太和医院住院进行手术治疗的93例女性乳腺癌患者作为乳腺癌组，同期收治的93例女性乳腺良性病变患者作为良性组，另选取同期在湖北省十堰市太和医院体检的93例女性健康体检者作为对照组。所有研究对象均进行超声检查，并记录相关参数［最大血流速度（Vmax）、血流阻力指数（RI）、搏动指数（PI）］；采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测所有研究对象血清miR-129-5p、miR-654-5p水平；绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析Vmax、RI、PI及血清miR-129-5p、miR-654-5p对乳腺癌的诊断价值。结果良性组、乳腺癌组血清miR-129-5p、miR-654-5p水平均明显低于对照组，且乳腺癌组血清miR-129-5p、miR-654-5p水平均低于良性组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。良性组、乳腺癌组Vmax、RI、PI均明显高于对照组，且乳腺癌组Vmax、RI、PI均高于良性组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、中低分化程度的乳腺癌患者血清miR-129-5p、miR-654-5p低表达比例均高于TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、高分化程度的乳腺癌患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。ROC曲线分析结果显示，Vmax、RI、PI、miR-129-5p、miR-654-5p联合诊断乳腺癌的曲线下面积（AUC）为0.892，大于5项单独诊断的AUC（0.712、0.783、0.720、0.648、0.718），差异均有统计学意义（Z=4.013、4.215、3.889、6.223、3.887，P＜0.05）。结论乳腺癌患者血清miR-129-5p、miR-654-5p水平均降低，超声参数（Vmax、RI、PI）均升高，超声参数联合血清miR-129-5p、miR-654-5p诊断乳腺癌的价值较高。