目的探讨肝细胞癌（HCC）患者血清微小核糖核酸-122（miR-122）、微小核糖核酸-25（miR-25）、微小核糖核酸-4429（miR-4429）水平及三者联合的诊断价值。方法选择2023年1月至2025年12月兴安盟人民医院收治的84例HCC患者作为研究组。选择同期在该院体检且年龄、性别匹配的84例健康体检者作为对照组。比较2组基线资料及血清miR-122、miR-25、miR-4429水平；比较不同临床病理特征下HCC患者血清miR-122、miR-25、miR-4429水平；采用多因素Logistic回归分析HCC发生的影响因素；绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-122、miR-25、miR-4429单独及三者联合对HCC的诊断价值。结果与对照组相比，研究组血清miR-122水平降低，血清miR-25、miR-4429水平升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。与Child-Pugh分级A~B级、CNLC分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤分化程度为中高分化及无远处转移的HCC患者相比，Child-Pugh分级C级、CNLC分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤分化程度为低分化及有远处转移的HCC患者血清miR-122水平降低，血清miR-25、miR-4429水平升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，血清miR-25、miR-4429水平升高均为HCC发生的危险因素（P<0.05），而血清miR-122水平升高为HCC发生的保护因素（P<0.05）。血清miR-122、miR-25、miR-4429单独及三者联合诊断HCC的AUC分别为0.762、0.796、0.773、0.899，三者联合诊断的AUC大于miR-122、miR-25、miR-4429单独诊断的AUC（Z=3.277、2.519、2.851，均P<0.05）。结论HCC患者血清miR-122水平降低，miR-25、miR-4429水平升高，三者均是HCC发生的影响因素，且与HCC的Child-Pugh分级、CNLC分期、肿瘤分化程度及远处转移有关，三者联合对HCC具有较高的诊断价值，且优于单一指标检测，可作为HCC辅助诊断的潜在血清学标志物组合。