目的:探究超声参数联合血清miR-129-5p和miR-654-5p水平对乳腺癌诊断的价值及临床意义。方法:选取本院2021年12月~2023年12月期间住院行手术的93例乳腺癌患者作为乳腺癌组,另选择本院同期乳腺良性病变患者93例设为良性组,健康体检者93例作为对照组。采用qRT-PCR法检测血清miR-129-5p和miR-654-5p表达水平；超声参数联合血清miR-129-5p和miR-654-5p水平对乳腺癌的诊断效能建立受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果:与对照组相比,良性组与乳腺癌组血清miR-129-5p和miR-654-5p均显著降低(P＜0.05),且乳腺癌组血清miR-129-5p和miR-654-5p低于良性组(P＜0.05)。与对照组相比,良性组与乳腺癌组Vmax、RI、PI均显著升高(P＜0.05),且乳腺癌组Vmax、RI、PI高于良性组(P＜0.05)。TNM分期为III+IV期、发生淋巴结转移、中低分化程度的乳腺癌患者miR-129-5p、miR-654-5p低表达比例高于TNM分期为I+II期、未发生淋巴结转移、高分化程度的乳腺癌患者(P＜0.05)。Vmax、RI、PI、miR-129-5p、miR-654-5p五者联合诊断乳腺癌的AUC最高,优于Vmax、RI、PI、miR-129-5p、miR-654-5p各自单独诊断(Z五者联合-Vmax=4.013、P=0.001,Z五者联合-RI=4.215、P＜0.001,Z五者联合-PI=3.889、P=0.001,Z五者联合-miR-129-5p=6.223、P＜0.001,Z五者联合-miR-654-5p=3.887、P=0.001),敏感度90.32%,特异性为79.57%。结论:乳腺癌患者血清miR-129-5p和miR-654-5p表达降低,超声参数Vmax、RI、PI均升高,五者联合可以更好的诊断乳腺癌的发生。